تأثير الظروف الثقافية على نمو الإشريشيا القولونية

استخدام E. coli لإنتاج الأدوية هو طريقة بيولوجية. أي استخدام تكنولوجيا الهندسة الحيوية لنقل الجينات الأجنبية إلى E. القولونية ، التخمير والثقافة للتعبير ، الطرد المركزي لجمع البكتيريا ، ومن ثم استخدام محلول محدد لكسر البكتيريا وجمعها. يتم تصنيع البروتين المستهدف في الطب بعد بعض المعالجة اللاحقة.

1. درجة حرارة الثقافة

تبين التجارب أن درجة حرارة الثقافة المثلى هي في حدود 35 ~ 40 ℃ ، وتزداد كثافة الخلايا مع زيادة درجة الحرارة ، وهو ما يتسق مع خصائص النمو العام لل E. كولي. ومع ذلك ، فإن معدل النمو أسرع عند 37 ℃ ~ 38 ℃ ، والنمو اللاحق مسطح نسبيًا. بالجمع بين خصائص الثقافة العامة للe. coli والتأثير التبادلي لدرجة الحرارة والعوامل المؤثرة الأخرى ، تم ضبط درجة حرارة الثقافة على ارتفاع درجة مئوية في التجربة.

2. قيمة pH

بعد زراعة E. لمدة 18 ساعة مع قيم pH مختلفة ، تظهر نتائج الاختبار أن قيمة pH لـ 50 ليس لها تأثير كبير على كثافة الخلايا ، وقيمة الرقم الهيدروجيني منخفضة جدًا أو مرتفعة جدًا لتحقيق نتائج جيدة. عندما تكون قيمة pH هي ، تكون كثافة الخلية أعلى نسبيًا وتصل إلى od600 نانومتر.

3. تأثير الأكسجين المذاب على نمو البكتيريا

وفقًا لمؤشر الأكسجين المذاب المختلف في المخمر ، تم الحصول على كثافة الخلايا لنظام التخمير عند زراعتها لمدة 18 ساعة. تبين النتائج التجريبية أن كثافة الخلية تزداد باستمرار مع زيادة في مؤشر الأكسجين الذائب ، ولكن كثافة الخلية تزداد ببطء بعد:.

4. تأثير كمية التطعيم

يمكن أن يكون لتحسين كميات التطعيم المختلفة تأثير أكبر على نمو البكتيريا. عند ، فإن حالة نمو البكتيريا أفضل من حالة التطعيم المنخفضة جدًا أو المرتفعة جدًا. كميات التطعيم المنخفضة جدًا ستجعل نمو البكتيريا بطيئًا جدًا. كمية اللقاح المرتفعة للغاية ستستهلك كمية كبيرة من العناصر الغذائية في المرحلة المبكرة وتتسبب في إهدار سلالات البذور ، لذلك تم استخدام كمية اللقاح في التجربة.

5. تحديد وقت الثقافة

أظهرت النتائج التجريبية لمختلف أوقات الحضانة أن البكتيريا زادت بمضاعفات من 12 إلى 18 ساعة ، ثم نمت ببطء. فإنه يظهر أنه في مرحلة لاحقة من النمو الأسي ، طاقة البكتيريا ليست مناسبة للتكاثر الشامل ، ولكنها تتأثر بالمستقلبات. لذلك ، من أجل تقصير دورة النمو ، يجب أن يكون حصاد البكتيريا في فترة النمو الأسي المتأخرة ، أي 18 ساعة.

6. تحديد السرعة

تزيد سرعة الحاضنة الهزازة مع زيادة الأكسجين المذاب وتزداد كثافة الخلايا وفقًا لذلك. يكون معدل نمو كثافة الخلايا أسرع عند حوالي 200r/min ، وبطيء نسبيًا عند حوالي 300r/min ، مما يشير إلى أن سرعة 200r/min يمكن أن تعزز بالفعل حل الأكسجين في الهواء. مع الأخذ بعين الاعتبار أن زيادة السرعة قد تنتج آثار سلبية مثل الرغوة ، وبالتالي فإن أفضل سرعة تم اعتمادها في الاختبار هي 200r/min.

* ما سبق هو مشاركة المقالات الأكاديمية. إذا كنت بحاجة إلى مزيد من التفاصيل ، يرجى النقر على العنوان.